Плодоводство
и виноградарство Юга России
Савельева Наталья Николаевна
Анапская зональная опытная станция виноградарства и виноделия» – филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Северо-Кавказский федеральный научный центр садоводства, виноградарства, виноделия»
ведущий научный сотрудник лаборатории генофонда
д-р биол. наук
Статьи в журнале (всего: 4)
К настоящему времени у яблони выявлено около 50 S-аллелей, однако в большинстве исследований анализируются сорта зарубежной селекции, тогда как для многих дикорастущих видов яблони, а также отечественных сортов сведения об аллельном состоянии S-гена недостаточны. В настоящем исследовании представлены результаты ПЦР-анализа дикорастущих форм рода Malus Mill., а также ряда культивируемых сортов яблони домашней по отдельным аллелям S-локуса. В качестве биологических объектов исследования использованы дикорастущие виды, разновидности рода Malus Mill., культивируемые сорта яблони домашней (Malus domestica Borkh.). Экстракция геномной ДНК проведена согласно протоколу компании Diversity Arrays Technology P/L с модификациями. Определены относительные частоты встречаемости S-аллелей в изучаемой коллекции. Аллельный статус S-локуса установлен для видовых форм M. cerasifera 29494 (S3S10), M. purpureav. pendula2396 (S2S3S10), M. prunifoliav. ringo (S7S9),M. spectabilisv. Rubraplena (S3S10); сортов Валюта (S5S9), Каскад (S3S10), Красуля (S7S9), Успенское (S2S3), Фрегат (S3S10), Чародейка (S9S10). Чёткой зависимости между аллельным состоянием S-локуса и таксономической принадлежностью генотипа не выявлено. У видов серии Ma-lus идентифицированы аллели S2, S3, S5, S7, S9, S10; у серий Baccatae и Kirghisores – ал-лели S2, S3, S5, S9, S10 (аллель S7 отсутствует). Анализ аллельного состояния S-локуса может использоваться в качестве косвенного маркерного признака уровня плоидности. Так как для организмов с диплоидным набором хромосом характерным является наличие двух S-аллелей, то присутствие трёх аллелей у вида M. Purpurea v. pendula 2396 (S2, S3и S10) косвенным образом свидетельствует о триплоидном геноме.
Создание новых сортов яблони – длительный и трудоёмкий процесс, включающий несколько последователь-ных этапов: селекционная работа, первич-ное изучение, государственное сортоис-пытание. Появление новых методов в биологии и, в частности, в молекулярной биологии, требует переосмысления подхода к каноническим принципам селекционной работы. Одним из перспективных направлений повышения эффективности селекционного процесса по культуре яблони является использование современ-ных методов молекулярно-генетического анализа генома на основе ДНК-маркеров. Сочетание методов классической селек-ции с ДНК-анализом исходных форм и гибридных популяций является перспективным направлением исследований, связанных с интенсификацией процесса создания генотипов с заданными параметрами ценных, селекционно значимых призна-ков. Биологическими объектами нашего исследования являлись сеянцы яблони гибридного фонда академика Российской академии наук Н.И. Савельева. В данной статье показаны результаты ДНК анализа гибридных сеянцев яблони по локусам моногенной устойчивости к парше (ген Rvi6) и колонновидного габитуса роста (ген Co) для идентификации генотипов с комплексом ценных признаков. В изучаемых комбинациях скрещивания количество сеянцев яблони, сочетающих иммунитет к парше с колонновидным габитусом кроны дерева (генотип Rvi6+Co), составило 33,3-40,9 %. В процессе проведенного нами исследования идентифицированы перспективные для селекции сеянцы яблони с генотипом Rvi6Rvi6+Coco, вовлечение которых в гибридизацию в качестве исходных форм позволит значительно интенсифицировать селекционный процесс, обеспечивая получение до 100 % сеянцев с моногенной устойчивостью к парше и до 50 % сеянцев – с колонновидным габитусом роста.
В селекции яблони одной из приоритетных задач является создание сортов с моногенно детерминированным иммунитетом к парше. Целью настоящего исследования являлось молекулярно- генетическое тестирование исходных форм и гибридных сеянцев Яблони для идентификации носителей целевых аллелей генов моногенной устойчивости к парше Rvi6, Rvi4, Rvi2, Rvi8, а также уточнение характера их наследования в гибридном потомстве. Биологическими объектами исследования являлись сорта яблони различного эколого- географического происхождения, а также сеянцы гибридного фонда академика Российской академии наук, доктора с.-х. наук Н.И. Савельева. В материалах данной статьи приведены результаты ДНК анализа сортов и гибридных сеянцев яблони по локусам моногенной устойчивости к парше (ген Rvi6, Rvi4, Rvi2, Rvi8). На основании проведённого молекулярно-генетического анализа уточнена генотипическая структура исходных форм. Молекулярно-генетический анализ исходных форм яблони с использованием маркеров VfC и AL07-SCAR показал присутствие в геноме гена Rvi6 в гетерозиготном состоянии (Rvi6rvi6) у сортов Былина, Кандиль орловский, Академик Казаков, Имант, Валюта, Белорусское сладкое, Успенское, Prima. Сорт Golden Delicious и форма NR12740-7A имеют рецессивный гомозиготный генотип. В результате проведенного исследования и на основа-нии молекулярно-генетического анализа уточнена генотипическая структура исходных форм и проанализировано совместное наследование в гибридном потомстве яблони локусов моногенной устойчивости к парше. Идентифицированы перспективные для селекции яблони источники генов Rvi6, Rvi4, Rvi2, Rvi8.
Моногенная устойчивость к парше – важный селекционный признак яблони. Использование молекулярных маркеров позволяет с высокой надёжностью на ранних этапах онтогенеза определить присутствие в геноме необходимых генов и сократить время селекционного процесса. В представленном исследовании показаны результаты ДНК анализа гибридных сеянцев яблони по генам Rvi6 и Rvi4 моногенной устойчивости к парше. Биологическими объектами исследования являлись исходные формы яблони сортов Академик Казаков, Былина, Валюта Имант, Кандиль орловский и сеянцы гибридных комбинаций Былина × Кандиль орловский, Кандиль орловский × Былина, Валюта × Имант, Валюта × Академик Казаков. Экстракция геномной ДНК проводилась из молодых листьев растений яблони согласно методу DArT. Для идентификации гена Rvi6 использовали SCAR маркер AL07, гена Rvi4 – мультиаллельный SCAR маркер AD13. Проанализировано совместное наследование указанных генов в гибридном потомстве. Среднее количество сеянцев яблони с генотипом Rvi6+Rvi4 по комбинациям скрещивания составило 34,8 %. Идентифицированы формы, совмещающие в геноме доминантный аллель гена Rvi4 с геном Rvi6 в доминантном гомозиготном состоянии (Rvi6Rvi6): 3-11-4, 3-11-33, 3-11-46 (Былина × Кандиль орловский), 31-11-17, 31-11-25, 31-11-42 (Кандиль орловский × Былина), 9-12-9, 9-12-30 (Валюта × Имант), 6-12-23, 6-12-24 (Валюта × Академик Казаков). Наибольшее количество сеянцев, совмещающих ген Rvi4 и с геном Rvi6 в доминантном гомозиготном состоянии, выявлено в комбинации Кандиль орловский × Былина (11,6 %), наименьшее их количество – в гибридной комбинации Валюта × Имант (6,4 %).